La ligne est très fréquente entre Strasbourg et Haguenau : il y a environ un train toutes les 20 minutes en journée et un toutes les 30 minutes dans la soirée entre les deux villes.
Le dernier train direct entre Haguenau > Strasbourg circule généralement vers 22 h 13 au départ de Haguenau, avec une arrivée à Strasbourg environ 30 minutes plus tard (vers 22 h 40-22 h 45).